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毛細(xì)管電泳正確的使用至關(guān)重要

更新時(shí)間:2020-12-02瀏覽:2031次

   毛細(xì)管電泳正確的使用至關(guān)重要

  毛細(xì)管電泳在新藥研發(fā)領(lǐng)域顯示出重要的應(yīng)用前景。CE采用水介質(zhì)作為實(shí)驗(yàn)系統(tǒng),保證了藥物篩選在與生命介質(zhì)相似的環(huán)境中進(jìn)行,優(yōu)于其他傳統(tǒng)的體外篩選方法。
  除了保持所選分子和靶點(diǎn)的生物活性外,CE篩選過程還強(qiáng)調(diào)配體和受體之間的相互作用。該電泳藥物篩選主要針對(duì)與藥理學(xué)理論相關(guān)的重要參數(shù),如結(jié)合常數(shù)KB、結(jié)合速率常數(shù)Kon和離解速率常數(shù)koff,有利于模擬和預(yù)測(cè)靶向藥物在體內(nèi)的相互作用過程。

毛細(xì)管電泳

  毛細(xì)管電泳的正確使用方法如下:
  1、儀器預(yù)熱及毛細(xì)管沖洗
  打開儀器和支持工作站。當(dāng)工作溫度設(shè)為3℃,不加電壓時(shí),按1mol/L NaOH溶液5min,二次水5min,1mmol/L nah2po4-na2hpo4 1:1緩沖液5min,沖洗過程中,出口應(yīng)與廢液的位置相一致不應(yīng)升起支架。
  2、混合標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備
  同時(shí)測(cè)定了標(biāo)準(zhǔn)樣品中苯甲酸的濃度。分別為5、1、2、5和1mg/ml。
  3、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線
  毛細(xì)管沖洗完畢后,取1ml混合好的標(biāo)準(zhǔn)樣品,放在塑料樣品管上,放在進(jìn)樣架上的樣品位置上,調(diào)整出(出)口到緩沖液(緩沖液)上,抬起支架固定,開始進(jìn)樣。注射壓力為3mbar,注射時(shí)間為5s。注射后,將入口支架的位置改回緩沖溶液,記住要回到緩沖位置!選擇方法24CE.mtw公司,修改適當(dāng)?shù)奈募f明,然后開始分析,電壓25kV,時(shí)間約1min。
  4、未知濃度混合樣品的測(cè)定
  方法和條件同上。對(duì)未知濃度的樣品進(jìn)行檢測(cè),分析時(shí)間約為25min,根據(jù)苯甲酸鈉的標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定雪碧和醒目飲料中苯甲酸鈉的含量。
  5、不同緩沖溶液中遷移時(shí)間的變化
  未知濃度混合樣品測(cè)定后,按1mol/L NaOH溶液5min,二次水5min,然后將進(jìn)出口兩端緩沖液改為2mmol/L Na2B4O7 5min,在此條件下,將未知濃度的混合樣品在25kV電壓下測(cè)試約1min,按之前的順序再次沖洗毛細(xì)管,并再次更換進(jìn)出口兩端的緩沖液,即1mmol/L nah2po4-na2hpo4,pH值為6,洗滌時(shí)間為5min,對(duì)未知濃度的混合樣品進(jìn)行測(cè)試,電壓為25kv,時(shí)間約為15min。
  好了,以上便是關(guān)于毛細(xì)管電泳的相關(guān)內(nèi)容介紹了。

 

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